徐浩:河蚬多肽体内外抗氧化活性及其对急性肝损伤保护的研究论文

徐浩:河蚬多肽体内外抗氧化活性及其对急性肝损伤保护的研究论文

本文主要研究内容

作者徐浩(2019)在《河蚬多肽体内外抗氧化活性及其对急性肝损伤保护的研究》一文中研究指出:氧化反应是生物体在新陈代谢过程中常发生的活动,活性氧(ROS)和活性氮(RN)作为其主要产物,在生理功能中起着双重作用。化学修饰的抗氧化剂对人体构成潜在危害而存在使用限制,所以从动植物中获取具有较高安全性和较高活性的天然抗氧化物质,对机体提高自身抗氧化能力具有重要意义。河蚬是一种双壳贝类,广泛分布于我国内陆水域,具有很高的营养价值。本文通过分离纯化技术提取河蚬中抗氧化肽,并进一步研究其对化学急性肝损伤的保护作用。研究结果如下:首先以河蚬软体为原料,对其营养成分及营养品质进行了比较和分析。结果表明:河蚬软体部分水分含量为86.64%,干样品中粗蛋白、粗脂肪以及灰分含量分别为62.80%、11.67%和4.82%。样品中有17种氨基酸(557.87 mg/g),氨基酸种类齐全,其中6种必需氨基酸(206.77 mg/g),占氨基酸总量的37.06%,且必需氨基酸与氨基酸总量构成比例达到国际标准要求。河蚬软体中还含有较丰富的矿物质,尤其是Cu和Zn元素均高于常见贝类。综上所述河蚬是一种具有较高营养价值的软体动物。通过对多肽获得率、水解度和DPPH自由基清除能力的测定,确定胰蛋白酶为河蚬的最佳水解酶。以DPPH自由基清除能力作为评价指标,进行水解单因素实验并通过响应面优化工艺参数。最终得到最优酶解条件为:酶解温度45℃、pH值7.5、料液比(w/v)1:7.5和酶加量2020 U/g。在此条件下得到的酶解液DPPH自由基的清除率达到62.22%。河蚬软体水解后,通过超滤系统将多肽分成>10 ku、10 ku-5 ku、<5 ku三个组分,结果表明<5 ku的多肽组分体外抗氧化活性最强。采用Sephadex G-25凝胶层析对分子量小于5 ku的河蚬多肽进一步分离,获得Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ四组分,通过细胞实验得出组分Ⅰ具有最强的保护HepG-2细胞免受H2O2氧化损伤能力,然后利用DEAE阴离子交换层析将组分Ⅰ分为九个组分,其中FⅠ-3具有最强的DPPH自由基清除能力,最终利用RP-HPLC纯化得到目标多肽X。通过质谱分析得其分子量为988.3 u,氨基酸序列为KGPAPFYPL。最后,利用CCl4构建小鼠化学急性肝损伤模型,研究小分子河蚬肽在增强小鼠抗氧化防御系统、抑制促炎症反应和肝细胞凋亡方面的作用。结果表明,小分子肽对小鼠无毒害作用,并且能够降低肝脏指数、提高脾脏指数,减少血清中ALT和AST含量,提高肝脏中SOD和CAT含量,减少MDA含量。通过HE染色、免疫组化实验和TUNEL染色观察,小分子多肽能够明显改善肝脏组织损伤,减少炎症因子的生成,同时抑制化学损伤导致的肝细胞凋亡。综上所述,小分子多肽具有保护肝脏的作用。

Abstract

yang hua fan ying shi sheng wu ti zai xin chen dai xie guo cheng zhong chang fa sheng de huo dong ,huo xing yang (ROS)he huo xing dan (RN)zuo wei ji zhu yao chan wu ,zai sheng li gong neng zhong qi zhao shuang chong zuo yong 。hua xue xiu shi de kang yang hua ji dui ren ti gou cheng qian zai wei hai er cun zai shi yong xian zhi ,suo yi cong dong zhi wu zhong huo qu ju you jiao gao an quan xing he jiao gao huo xing de tian ran kang yang hua wu zhi ,dui ji ti di gao zi shen kang yang hua neng li ju you chong yao yi yi 。he xian shi yi chong shuang ke bei lei ,an fan fen bu yu wo guo nei liu shui yu ,ju you hen gao de ying yang jia zhi 。ben wen tong guo fen li chun hua ji shu di qu he xian zhong kang yang hua tai ,bing jin yi bu yan jiu ji dui hua xue ji xing gan sun shang de bao hu zuo yong 。yan jiu jie guo ru xia :shou xian yi he xian ruan ti wei yuan liao ,dui ji ying yang cheng fen ji ying yang pin zhi jin hang le bi jiao he fen xi 。jie guo biao ming :he xian ruan ti bu fen shui fen han liang wei 86.64%,gan yang pin zhong cu dan bai 、cu zhi fang yi ji hui fen han liang fen bie wei 62.80%、11.67%he 4.82%。yang pin zhong you 17chong an ji suan (557.87 mg/g),an ji suan chong lei ji quan ,ji zhong 6chong bi xu an ji suan (206.77 mg/g),zhan an ji suan zong liang de 37.06%,ju bi xu an ji suan yu an ji suan zong liang gou cheng bi li da dao guo ji biao zhun yao qiu 。he xian ruan ti zhong hai han you jiao feng fu de kuang wu zhi ,you ji shi Cuhe Znyuan su jun gao yu chang jian bei lei 。zeng shang suo shu he xian shi yi chong ju you jiao gao ying yang jia zhi de ruan ti dong wu 。tong guo dui duo tai huo de lv 、shui jie du he DPPHzi you ji qing chu neng li de ce ding ,que ding yi dan bai mei wei he xian de zui jia shui jie mei 。yi DPPHzi you ji qing chu neng li zuo wei ping jia zhi biao ,jin hang shui jie chan yin su shi yan bing tong guo xiang ying mian you hua gong yi can shu 。zui zhong de dao zui you mei jie tiao jian wei :mei jie wen du 45℃、pHzhi 7.5、liao ye bi (w/v)1:7.5he mei jia liang 2020 U/g。zai ci tiao jian xia de dao de mei jie ye DPPHzi you ji de qing chu lv da dao 62.22%。he xian ruan ti shui jie hou ,tong guo chao lv ji tong jiang duo tai fen cheng >10 ku、10 ku-5 ku、<5 kusan ge zu fen ,jie guo biao ming <5 kude duo tai zu fen ti wai kang yang hua huo xing zui jiang 。cai yong Sephadex G-25ning jiao ceng xi dui fen zi liang xiao yu 5 kude he xian duo tai jin yi bu fen li ,huo de Ⅰ、Ⅱ、Ⅲhe Ⅳsi zu fen ,tong guo xi bao shi yan de chu zu fen Ⅰju you zui jiang de bao hu HepG-2xi bao mian shou H2O2yang hua sun shang neng li ,ran hou li yong DEAEyin li zi jiao huan ceng xi jiang zu fen Ⅰfen wei jiu ge zu fen ,ji zhong FⅠ-3ju you zui jiang de DPPHzi you ji qing chu neng li ,zui zhong li yong RP-HPLCchun hua de dao mu biao duo tai X。tong guo zhi pu fen xi de ji fen zi liang wei 988.3 u,an ji suan xu lie wei KGPAPFYPL。zui hou ,li yong CCl4gou jian xiao shu hua xue ji xing gan sun shang mo xing ,yan jiu xiao fen zi he xian tai zai zeng jiang xiao shu kang yang hua fang yu ji tong 、yi zhi cu yan zheng fan ying he gan xi bao diao wang fang mian de zuo yong 。jie guo biao ming ,xiao fen zi tai dui xiao shu mo du hai zuo yong ,bing ju neng gou jiang di gan zang zhi shu 、di gao pi zang zhi shu ,jian shao xie qing zhong ALThe ASThan liang ,di gao gan zang zhong SODhe CAThan liang ,jian shao MDAhan liang 。tong guo HEran se 、mian yi zu hua shi yan he TUNELran se guan cha ,xiao fen zi duo tai neng gou ming xian gai shan gan zang zu zhi sun shang ,jian shao yan zheng yin zi de sheng cheng ,tong shi yi zhi hua xue sun shang dao zhi de gan xi bao diao wang 。zeng shang suo shu ,xiao fen zi duo tai ju you bao hu gan zang de zuo yong 。

论文参考文献

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  • 论文详细介绍

    论文作者分别是来自合肥工业大学的徐浩,发表于刊物合肥工业大学2019-09-20论文,是一篇关于河蚬论文,水解论文,分离论文,纯化论文,抗氧化论文,急性肝损伤论文,合肥工业大学2019-09-20论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自合肥工业大学2019-09-20论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。

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