受体介导的基因转移论文-佟豪,巴雅尔,王晓娟

受体介导的基因转移论文-佟豪,巴雅尔,王晓娟

导读:本文包含了受体介导的基因转移论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:靶向性,基因转移系统,肝癌,基因治疗

受体介导的基因转移论文文献综述

佟豪,巴雅尔,王晓娟[1](2008)在《转铁蛋白受体介导的Survivin反义RNA基因转移系统的构建及体外效应研究》一文中研究指出目的:构建转铁蛋白受体介导的Survivin反义RNA基因转移系统并观察其对肝癌细胞的体外杀伤效应及凋亡检测。方法:用EDC法制备抗转铁蛋白受体与多聚左旋赖氨酸(PLL)的复合物并用分子筛层析纯化。根据DNA阻滞实验结果Survivin反义RNA重组质粒与Ab-PLL按1:3混合使二者结合形成Ab-pLL-Survivin反义RNA(质粒DNA)复合物,将此复合物转染人肝癌细胞株HepG2细胞观察其对HepG2细胞的杀伤效应及细胞凋亡的影响。结果:转染复合物组HepG2细胞的增殖受抑制、凋亡明显增多。结论:本基因体系具有很好的靶向性及杀伤、促凋亡效应。(本文来源于《内蒙古医学杂志》期刊2008年02期)

潘海涛,郑启新,郭晓东[2](2006)在《受体介导的基因转移研究进展》一文中研究指出受体介导的基因转移具有靶向、高效、安全、低免疫原性和制备简单等许多优点。简要综述了受体介导基因转移的主要类型、影响受体介导基因转移的因素和提高基因转移效率的策略等方面的进展。(本文来源于《国际生物医学工程杂志》期刊2006年01期)

孙兴会[3](2004)在《尿激酶受体介导的基因转移研究》一文中研究指出基因治疗的载体可以分为病毒载体和非病毒载体两大类。病毒载体是目前基因治疗的主要载体,但是病毒载体具有携带外源基因片段大小受到限制(7kb左右)、易引起机体免疫反应以及制备、贮存、质量控制比较困难等固有缺点,这促进了人们对非病毒载体的研究。在过去的十多年里,人们对受体介导的基因转移进行了广泛的研究,并取得了较大的进展。受体介导的基因转移有安全、低免疫原性、相对靶向性、载体制备简单、易规模化等许多优点。常用的受体有去唾液酸糖蛋白受体、胰岛素受体、血管内皮细胞生长因子受体、转铁蛋白受体、甘露糖受体、表皮生长因子受体、叶酸受体等。 肿瘤转移是肿瘤患者死亡的重要原因,尿激酶(urokinase,uPA)以及尿激酶受体(urokinase receptor,uPAR)在肿瘤转移过程中发挥着重要的作用。尿激酶受体以及纤溶系统中某些其它成员成为抑制肿瘤转移的靶标。靶向uPA和uPAR的单克隆抗体、可溶性uPAR、能阻断uPA和uPAR相互作用的uPA衍生肽都可以抑制肿瘤细胞的侵袭和转移,uPAR反义核酸表达质粒对肿瘤细胞的侵袭和转移也有明显的抑制作用。 为了观察尿激酶受体反义核酸对肿瘤细胞的作用以及探讨尿激酶受体介导的基因转移的可能性,我们先利用重组腺病毒技术,在人肺巨细胞癌高转移株95D细胞中表达了尿激酶受体的反义基因,并观察其作用:同时表达纯化了尿激酶氨基末端的突变体,与报告基因表达质粒组装成复合物,观察该基因转移系统的基因转移效率,并介导尿激酶受体反义核酸靶向尿激酶受体的基因转移。 一.重组腺病毒介导的uPAR反义基因转移 为了观察uPAR反义核酸对肿瘤细胞体外侵袭的抑制作用,用PCR方法扩增uPAR cDNA 5’端-46bp至+454bp一段长500bp的序列,克隆到病毒载体pAdeno-X中,构建出重组腺病毒载体pAdeno-X-uPAR(-)和pAdeno-X-uPAR(+)。PacI限制性内切酶线性化重组腺病毒载体,转染HEK293细胞,7天后可以获得滴度(pfu/ml)分别为1.5×10~8和0.5×10~8的uPAR反义和正义核酸表达重组腺病毒,分别命名为Ad-uPAR(-)和Ad-uPAR(+)。以不同的病毒感染指数(MOI)感染人肺巨细胞癌高转移株95D肿瘤细胞,3天后用RNA印迹法可以检测到肿瘤细胞中uPAR正义和反义核酸表达,随着MOI的升高,在Ad-uPAR(-)感染的肿瘤细胞中uPAR蛋白质水平逐渐下降,肿瘤细胞的体外侵袭能力也明显下降,而感染Ad一uPAR(+)的肿瘤细胞无明显变化。结果表明重组腺病毒可以表达uRAR正义和反义核酸,uPAR反义核酸可以下调95D肿瘤细胞uPAR蛋白质水平,并明显抑制人肺巨细胞癌高转移株95D肿瘤细胞在体外的侵袭能力。二.尿激酶受体介导的报告基因转移 利用能够被细胞内吞的重组蛋白发展靶向性非病毒载体系统,并进行基因转移是一个很有希望的研究方向。融合蛋白ATF一lyS10的氨基末端是尿激酶氨基末端135个氨基酸,起结合尿激酶受体的作用;梭基末端是10个赖氨酸,起结合质粒DNA的作用。在大肠杆菌中表达的ATF一lyslo主要以可溶形式存在,并具有人尿激酶的抗原性。纯化后的ATF一lyslo可以阻滞质粒DNA的迁移,并具有和细胞表面的尿激酶受体结合的能力。质粒DNA与ATF一lyslo以及多聚赖氨酸组装的基因转移复合物可以介导报告基因的转移,氯喳可以明显提高基因转移的效率,流感病毒血凝素融合肚的重组蛋白不能提高基因转移的效率。实验结果表明:①以ATF一lyslo重组融合蛋白组装的基因转移系统可以介导基因的转移②具有DNA结合能力和细胞靶向性的重组蛋白质ATF一lyslo为非病毒基因转移系统提供了一种新的途径。叁.尿激酶受体介导的ul】AR反义基因转移 将uPAR反义核酸表达质粒与ATF一lyslo以及多聚赖氨酸组装成基因转移复合物,并转染95D细胞。结果发现,AfF一lyslo介导的u队R反义核酸基因转移可以下调细胞uPAR蛋白水平,并降低细胞与纤连蛋白的粘附能力。Rl’- PCR可以检测到u队R反义核酸的表达,但uPAR mRNA水平没有明显下降。 ATF一lyslo介导的基因转移具有uPAR靶向性,而且基因转移复合物制备相对比较简单。其主要缺点有:①基因转移效率低;②基因转移复合物不够稳定,体内实验比较困难;③基因转移复合物存在非特异性结合细胞的可能。(本文来源于《复旦大学》期刊2004-04-20)

杨道锋,朱慧芬,沈关心,田德英[4](2004)在《转铁蛋白受体介导的自杀基因转移系统的建立及其体外抗瘤效应》一文中研究指出目的 构建转铁蛋白受体介导的自杀基因系统并观察其对肝癌细胞的体外杀伤效应。 方法SPDP法制备抗转铁蛋白受体与多聚赖氨酸(PLL)的复合物并用分子筛层析纯化。根据DNA阻断试验结果,pEBAF/tk重组质粒与Ab~PLL按1∶6混合使二者结合形成PEBAF/tk-Ab-PLL复合物。将此复合物转入人肝癌细胞株SMMC7721、HepG2和肺癌细胞株A549,并以脂质体转移为对照。加入不同浓度的更昔洛韦(GCV)以观察细胞的自杀效应。 结果 加入GCV后HepG2/tk的增殖受抑制最明显。100 mg/L和1 mg/L时抑制率分别为60.5%和24.3%。SMMC7721/tk受抑制较低,而A549的增殖不受抑制。 结论 本基因治疗体系具有很好的靶向性和杀肿瘤效果。(本文来源于《中华肝脏病杂志》期刊2004年02期)

马春红,孙汶生,田培坤,刘素侠,王晓燕[5](2004)在《表皮生长因子受体介导的新型肝癌靶向性基因转移》一文中研究指出如何使得外源基因稳定地从吞噬溶酶体中释放 ,是提高受体介导基因转移系统转移效率的关键。本文以绿色荧光蛋白质粒为报告基因 ,合成针对表皮生长因子受体 (EGFR)的相应 16肽配体寡肽和流感病毒血凝素HA2 0寡肽 ,并与多聚赖氨酸连接 ,连接物与绿色荧光蛋白报告基因按 1∶1混合 ,构建新型肝癌靶向性转移系统 ,命名为四元复合体。分别以四元复合体和脂质体在体内外进行基因转染 ,流式细胞仪和激光共聚焦显微镜检测绿色荧光蛋白表达。结果表明 ,四元复合体介导基因定向转染至肿瘤细胞 ,其转染率为 44 95 % ,显着高于脂质体转染组( 3 3 0 9% ,P <0 0 5 ) ,动物实验证明 ,四元复合体介导绿色荧光蛋白特异性表达于肿瘤细胞 ,具有良好的应用前景(本文来源于《基础医学与临床》期刊2004年01期)

曹利民[6](2003)在《受体介导的基因转移治疗肿瘤的研究现状》一文中研究指出肿瘤基因治疗的实施主要包括以下 3个方面 :( 1)寻找具有治疗意义的目的基因 ;( 2 )建立有效的靶细胞向转移目的基因的载体系统 ;( 3)使目的基因在靶细胞中表达 ,发挥生物学效应达到治疗目的 ,目的基因成功转移入靶细胞是基因治疗最重要的环节。肿瘤(本文来源于《南通医学院学报》期刊2003年01期)

任常春[7](2002)在《受体介导的基因转移与基因治疗》一文中研究指出基因治疗成功的关键在于将治疗基因靶向性转移到细胞或组织,受体介导的基因转移能满足此要求,很有发展潜力的基因转移方法。然而,要将这种转移方法用于基因治疗,与转移系统有关的万分的化学特性与物理反应,靶细胞的受体表达水平,DNA配体复合物怎样逃逸溶酶体的降解以及包含在复合物中的外源基因的表达等都是至关重要的。本文综述了受体介导的基因转移的基本原理。DNA配体复合物形成的最佳条件与性质,影响基因转移与表达的各种因素以及近年来国内外受体介导的基因转移用于基因治疗取得的进展。(本文来源于《中国肿瘤生物治疗杂志》期刊2002年02期)

陶箭,胡宝玉,童善庆,张希衡[8](2001)在《转铁蛋白受体介导肿瘤坏死因子α基因转移的抗肿瘤效果》一文中研究指出肿瘤坏死因子α(TNFα)对多种肿瘤细胞产生直接杀伤。使用超分子复合物载体,通过受体介导内吞作用使TNFα基因转移到肿瘤细胞并表达,提高肿瘤局部TNFα浓度,可能激发和加强机体抗肿瘤免疫效应。构建转铁蛋白(TF)和多聚赖氨酸交联蛋白,pSVk3TNFα为(本文来源于《中华微生物学和免疫学杂志》期刊2001年01期)

陶箭,邢敏智,胡宝瑜,张希衡,童善庆[9](2000)在《受体介导基因转移的体外研究》一文中研究指出目前 ,基因治疗大多使用重组病毒载体 ,转移和表达外源基因的效率较高 ,但所载片断较短、具潜在感染和插入突变的危险性。非病毒载体主要有脂质体和受体介导途径 ,前者虽有较高效率 ,但不具特异靶向性。使用超分子复合物载体 ,通过受体介导内吞作用 ,对真核生物(本文来源于《中国肿瘤生物治疗杂志》期刊2000年03期)

刘革修,张彤,陈临溪,曹建国,廖端芳[10](2000)在《碱性成纤维生长因子受体介导的基因转移系统的建立》一文中研究指出化学合成N端含多个赖氨酸残基、C端为人碱性成纤维生长因子(bFGF)的受体结合的26肽(FDKg);经细 胞培养、基因转染、报道基因检测等实验。结果表明,合成肽FDK9能通过电性中和与DNA分子结合,DNA凝胶阻 滞试验表明浓度为A=1的FDK9肽每4μL能与1μL萤火虫荧光素酶表达质粒pEBluc完全结合,核酸复合物直接加入 人脐静脉内皮细胞的培养液中, 48h后可从细胞裂解液中测出荧光素酶的显着表达,而缺乏 bFGF受体的 A431细胞 裂解液无荧光素酶的表达。表明已成功建立了bFGF受体介导的基因转移系统,推测该系统可特异地将外源基因导入 FGF受体过量表达的再狭窄动脉壁。(本文来源于《基础医学与临床》期刊2000年02期)

受体介导的基因转移论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

受体介导的基因转移具有靶向、高效、安全、低免疫原性和制备简单等许多优点。简要综述了受体介导基因转移的主要类型、影响受体介导基因转移的因素和提高基因转移效率的策略等方面的进展。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

受体介导的基因转移论文参考文献

[1].佟豪,巴雅尔,王晓娟.转铁蛋白受体介导的Survivin反义RNA基因转移系统的构建及体外效应研究[J].内蒙古医学杂志.2008

[2].潘海涛,郑启新,郭晓东.受体介导的基因转移研究进展[J].国际生物医学工程杂志.2006

[3].孙兴会.尿激酶受体介导的基因转移研究[D].复旦大学.2004

[4].杨道锋,朱慧芬,沈关心,田德英.转铁蛋白受体介导的自杀基因转移系统的建立及其体外抗瘤效应[J].中华肝脏病杂志.2004

[5].马春红,孙汶生,田培坤,刘素侠,王晓燕.表皮生长因子受体介导的新型肝癌靶向性基因转移[J].基础医学与临床.2004

[6].曹利民.受体介导的基因转移治疗肿瘤的研究现状[J].南通医学院学报.2003

[7].任常春.受体介导的基因转移与基因治疗[J].中国肿瘤生物治疗杂志.2002

[8].陶箭,胡宝玉,童善庆,张希衡.转铁蛋白受体介导肿瘤坏死因子α基因转移的抗肿瘤效果[J].中华微生物学和免疫学杂志.2001

[9].陶箭,邢敏智,胡宝瑜,张希衡,童善庆.受体介导基因转移的体外研究[J].中国肿瘤生物治疗杂志.2000

[10].刘革修,张彤,陈临溪,曹建国,廖端芳.碱性成纤维生长因子受体介导的基因转移系统的建立[J].基础医学与临床.2000

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