本文主要研究内容
作者刘琪文（2019）在《源于远缘杂交的同源四倍体鱼育性及HPG轴相关基因的表达研究》一文中研究指出：远缘杂交不仅能增加杂交后代的遗传变异,还能获得不同倍性的后代。红鲫（Carassius auratus red var.）（2n=100,♀）与团头鲂（Megalobrama amblycephala）（2n=48,♂）远缘杂交培育出两性可育的同源四倍体鱼,通过多代自交后形成了世界首例两性可育的同源四倍体鱼品系(F2F13)。鱼类的性腺发育与配子成熟主要受到脑—垂体—性腺轴（HPG）为核心的神经和内分泌系统调控。促性腺激素释放激素（GnRH）、促性腺激素（GtH）和促性腺激素受体（GTHR）作为HPG轴上的主要信号分子参与整个调控过程,共同促进性腺发育成熟。同源四倍体鱼源于红鲫的全基因组复制,育性与红鲫一样均为一年性成熟。本研究采用组织学、分子生物学和免疫荧光技术,首次对源于远缘杂交的同源四倍体鱼育性及其HPG轴相关基因Gnrh2、Fshβ、Lhβ、Fshr和Lhr的基因结构及表达特征进行了分析。主要内容及结果如下:1.通过组织学切片,对同源四倍体鱼和红鲫繁殖期垂体结构及不同发育时期的性腺结构进行了比较分析,结果表明同源四倍体鱼的垂体和性腺组织具有正常结构,而且同源四倍体鱼与其原始母本红鲫性腺发育基本同步。这一研究从细胞水平上阐述了同源四倍体鱼具有良好的育性基础。2.Gnrh2、Fshβ、Lhβ、Fshr和Lhr基因cDNA部分序列克隆及遗传分析结果表明,Fshβ、Lhβ和Fshr基因编码区序列在两种鱼中的相似度为100%,而Gnrh2和Lhr基因存在明显的碱基位点突变。这一研究表明,Fshβ、Lhβ和Fshr基因的编码区序列在同源四倍体鱼和红鲫中具有高度的保守性,而Gnrh2和Lhr基因在同源四倍体化后表现出明显的基因结构分化。这种变化可能为二倍体化的染色体配对提供物质基础,有利于同源四倍体鱼育性的恢复。3.通过RT-PCR比较分析Gnrh2、Fshβ、Lhβ、Fshr和Lhr基因在同源四倍体鱼不同组织中的表达情况发现,Gnrh2基因不仅在脑中有表达,在垂体、卵巢和精巢中也检测到表达;Fshβ和Lhβ基因只在垂体中检测到表达;Fshr和Lhr基因在精巢和卵巢中检测到表达。这一表达情况与红鲫中表达结果相似。通过Real-time PCR比较分析了Gnrh2、Fshβ、Lhβ、Fshr和Lhr基因在两种鱼的繁殖期和非繁殖期的表达量水平情况,发现这五个基因在同源四倍体鱼中的表达水平比在红鲫中高。实验结果说明同源多倍体化后,这五个基因的主要表达特征没有发生明显变化,但基因表达水平产生显著差异,而这种表达水平的改变可能与同源四倍体鱼的育性恢复有关。4.通过免疫荧光实验观察了Fshr和Lhr在同源四倍体鱼和红鲫性腺中的定位,发现Fshr和Lhr在同源四倍体鱼的卵巢颗粒细胞和滤泡细胞中都能检测到信号,在精巢Sertoli细胞和Leydig细胞也都能检测到信号。而且Fshr和Lhr在同源四倍体鱼中的结果与红鲫一致,进一步说明了同源四倍体化后的鲫鱼中生殖发育相关基因Fshr和Lhr的表达特征没有发生明显变化。
Abstract
yuan yuan za jiao bu jin neng zeng jia za jiao hou dai de wei chuan bian yi ,hai neng huo de bu tong bei xing de hou dai 。gong ji （Carassius auratus red var.）（2n=100,♀）yu tuan tou fang （Megalobrama amblycephala）（2n=48,♂）yuan yuan za jiao pei yo chu liang xing ke yo de tong yuan si bei ti yu ,tong guo duo dai zi jiao hou xing cheng le shi jie shou li liang xing ke yo de tong yuan si bei ti yu pin ji (F2F13)。yu lei de xing xian fa yo yu pei zi cheng shou zhu yao shou dao nao —chui ti —xing xian zhou （HPG）wei he xin de shen jing he nei fen bi ji tong diao kong 。cu xing xian ji su shi fang ji su （GnRH）、cu xing xian ji su （GtH）he cu xing xian ji su shou ti （GTHR）zuo wei HPGzhou shang de zhu yao xin hao fen zi can yu zheng ge diao kong guo cheng ,gong tong cu jin xing xian fa yo cheng shou 。tong yuan si bei ti yu yuan yu gong ji de quan ji yin zu fu zhi ,yo xing yu gong ji yi yang jun wei yi nian xing cheng shou 。ben yan jiu cai yong zu zhi xue 、fen zi sheng wu xue he mian yi ying guang ji shu ,shou ci dui yuan yu yuan yuan za jiao de tong yuan si bei ti yu yo xing ji ji HPGzhou xiang guan ji yin Gnrh2、Fshβ、Lhβ、Fshrhe Lhrde ji yin jie gou ji biao da te zheng jin hang le fen xi 。zhu yao nei rong ji jie guo ru xia :1.tong guo zu zhi xue qie pian ,dui tong yuan si bei ti yu he gong ji fan shi ji chui ti jie gou ji bu tong fa yo shi ji de xing xian jie gou jin hang le bi jiao fen xi ,jie guo biao ming tong yuan si bei ti yu de chui ti he xing xian zu zhi ju you zheng chang jie gou ,er ju tong yuan si bei ti yu yu ji yuan shi mu ben gong ji xing xian fa yo ji ben tong bu 。zhe yi yan jiu cong xi bao shui ping shang chan shu le tong yuan si bei ti yu ju you liang hao de yo xing ji chu 。2.Gnrh2、Fshβ、Lhβ、Fshrhe Lhrji yin cDNAbu fen xu lie ke long ji wei chuan fen xi jie guo biao ming ,Fshβ、Lhβhe Fshrji yin bian ma ou xu lie zai liang chong yu zhong de xiang shi du wei 100%,er Gnrh2he Lhrji yin cun zai ming xian de jian ji wei dian tu bian 。zhe yi yan jiu biao ming ,Fshβ、Lhβhe Fshrji yin de bian ma ou xu lie zai tong yuan si bei ti yu he gong ji zhong ju you gao du de bao shou xing ,er Gnrh2he Lhrji yin zai tong yuan si bei ti hua hou biao xian chu ming xian de ji yin jie gou fen hua 。zhe chong bian hua ke neng wei er bei ti hua de ran se ti pei dui di gong wu zhi ji chu ,you li yu tong yuan si bei ti yu yo xing de hui fu 。3.tong guo RT-PCRbi jiao fen xi Gnrh2、Fshβ、Lhβ、Fshrhe Lhrji yin zai tong yuan si bei ti yu bu tong zu zhi zhong de biao da qing kuang fa xian ,Gnrh2ji yin bu jin zai nao zhong you biao da ,zai chui ti 、luan chao he jing chao zhong ye jian ce dao biao da ;Fshβhe Lhβji yin zhi zai chui ti zhong jian ce dao biao da ;Fshrhe Lhrji yin zai jing chao he luan chao zhong jian ce dao biao da 。zhe yi biao da qing kuang yu gong ji zhong biao da jie guo xiang shi 。tong guo Real-time PCRbi jiao fen xi le Gnrh2、Fshβ、Lhβ、Fshrhe Lhrji yin zai liang chong yu de fan shi ji he fei fan shi ji de biao da liang shui ping qing kuang ,fa xian zhe wu ge ji yin zai tong yuan si bei ti yu zhong de biao da shui ping bi zai gong ji zhong gao 。shi yan jie guo shui ming tong yuan duo bei ti hua hou ,zhe wu ge ji yin de zhu yao biao da te zheng mei you fa sheng ming xian bian hua ,dan ji yin biao da shui ping chan sheng xian zhe cha yi ,er zhe chong biao da shui ping de gai bian ke neng yu tong yuan si bei ti yu de yo xing hui fu you guan 。4.tong guo mian yi ying guang shi yan guan cha le Fshrhe Lhrzai tong yuan si bei ti yu he gong ji xing xian zhong de ding wei ,fa xian Fshrhe Lhrzai tong yuan si bei ti yu de luan chao ke li xi bao he lv pao xi bao zhong dou neng jian ce dao xin hao ,zai jing chao Sertolixi bao he Leydigxi bao ye dou neng jian ce dao xin hao 。er ju Fshrhe Lhrzai tong yuan si bei ti yu zhong de jie guo yu gong ji yi zhi ,jin yi bu shui ming le tong yuan si bei ti hua hou de ji yu zhong sheng shi fa yo xiang guan ji yin Fshrhe Lhrde biao da te zheng mei you fa sheng ming xian bian hua 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自湖南师范大学的刘琪文，发表于刊物湖南师范大学2019-10-31论文，是一篇关于同源四倍体鱼论文,湖南师范大学2019-10-31论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自湖南师范大学2019-10-31论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。