氧还平衡论文-张慧

氧还平衡论文-张慧

导读:本文包含了氧还平衡论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:拟南芥,生态型,自然变异,芽再生

氧还平衡论文文献综述

张慧[1](2016)在《硫氧还蛋白DCC1介导的活性氧平衡调控不同生态型拟南芥芽再生能力差异的分子机理研究》一文中研究指出芽再生是构建遗传转化系统、进行基因功能研究和转基因育种的基础。然而,很多植物的芽再生比较困难,即使在同一物种内不同基因型之间普遍存在芽再生能力的明显差异,但人们对造成这种差异的关键基因及其调控机理目前所知甚少。本课题以生态型资源丰富的拟南芥为研究材料,通过比较分析它们的芽再生能力,进而利用图位克隆策略并结合遗传学、分子生物学和生物化学等技术手段,鉴定调控不同生态型拟南芥芽再生能力差异的关键基因,初步揭示其分子机理。研究结果也将为克服其它植物芽再生的顽拗性、提高繁殖系数和遗传转化效率提供理论参考。本研究通过对48种生态型芽再生能力的分析发现,不同生态型拟南芥的再生能力差异明显。在芽诱导培养基(SIM)上培养32天时,Col-0、Ws-0、Pu2-7、Lan-0和Bu-0等生态型的再生频率已达100%,而Nc-1、Wa-1、Gu-0和Kelsterbach-4生态型的再生频率仍然很低。这些结果表明不同生态型拟南芥再生频率具有广泛的多样性。在此基础上,我们选取再生能力差异极显着的Col-0和Gu-0生态型,通过图位克隆鉴定出不同生态型拟南芥芽再生调控关键候选基因DCC1。通过多态性和连锁不平衡分析发现,DCC1基因的6个SNPs多态性位点与不同生态型拟南芥的芽再生能力差异紧密关联。在芽再生过程中,DCC1主要在外植体及愈伤组织的内部组织中表达。与野生型相比,Col-0背景的dcc1突变体再生受到严重抑制,再生频率与再生芽数显着降低。当将Col-0生态型中DCC1基因转入突变体dcc1,可以恢复其表型,而Gu-0生态型的DCC1基因却无法互补dcc1突变体表型,说明Gu-0生态型中DCC1基因的自然变异导致芽再生能力降低。DCC1编码一个硫氧还蛋白,定位于线粒体与叶绿体中。我们推测DCC1可能参与调控活性氧的水平。在芽再生过程中,利用DAB染色,发现DCC1功能缺失导致活性氧水平升高、芽再生能力降低;而在芽再生过程中外施H2O2,会严重抑制芽的再生,并且随H2O2浓度的升高,芽的再生能力逐渐降低。这些结果暗示DCC1可能通过介导活性氧的水平调控芽的再生。为进一步解析DCC1在维持活性氧水平动态平衡中的作用机理,我们开展了酵母双杂交、Pull-down和BiFC等实验。结果表明DCC1与CA2蛋白互作。CA2编码一个碳醛酸酶,参与线粒体呼吸链复合体Ⅰ的组装,而线粒体呼吸链复合体Ⅰ活性会影响活性氧的水平。与DCC1类似,CA2突变也会导致活性氧水平的升高与芽的再生能力降低。同时,与野生型相比,dcc1、ca2和dcclca2和双突变体中线粒体呼吸链复合体Ⅰ活性发生显着性降低。结果表明DCC1通过与CA2互作调控呼吸链复合体Ⅰ活性,进而影响活性氧的水平,参与芽再生的调控。在芽再生过程中,外施不同浓度的还原型谷胱甘肽(GSH)可以提高dcc1与ca2突变体芽再生能力;当GSH达到一定浓度时,可完全恢复单突变体dcc1、ca2以及双突变体dcc1ca2表型,这些结果表明通过降低活性氧水平,可有效促进芽的再生。在此基础上,我们对不同生态型拟南芥芽再生过程中的活性氧水平进行了检测,发现活性氧水平与芽再生能力具有一定的相关性,通常表现为芽再生能力高的生态型含有较低水平的活性氧,说明活性氧水平是造成不同生态型拟南芥芽再生能力差异的重要原因之一。我们的研究揭示出硫氧还蛋白基因DCC1的多态性与拟南芥芽再生能力的生态型差异具有密切关系。DCC1通过调节活性氧的水平进而调控芽的再生能力。研究结果为理解芽再生能力基因型差异的分子机理提供了新的视角和手段,同时也对克服粮食作物和园艺植物的再生障碍、提高遗传转化效率具有一定的理论指导意义。(本文来源于《山东农业大学》期刊2016-05-10)

荆晓姝,孙苑玲,向敏,钱泽勇,郎涛[2](2015)在《秋茄硫氧还蛋白调控活性氧平衡增强烟草耐盐机制研究》一文中研究指出硫氧还蛋白(Trxs)能调控细胞的氧化还原状态,在木本植物中Trxs与耐盐性的关系尚未研究。本文克隆了非泌盐红树秋茄的硫氧还蛋白基因KcTrxf,并研究KcTrxf在植物耐盐性中的作用。qRT-PCR结果显示,秋茄在盐胁迫下KcTrxf表达量上调,并且叶片中的非蛋白巯基(NPTs)的含量上升。KcTrxf基因的开放阅读框(ORF)长585bp,编码194个氨基酸,是一类定位于叶绿体中的f类硫氧还蛋白。将重组的35S:KcTrxf表达载体转入模式植物烟草中进行耐盐性分析,结果表明,KcTrxf提高了烟草的耐盐性。NaCl处理下,野生型烟草叶片中膜质氧化,并且积累大量活性氧,使叶绿素含量以及叶绿素a/b比值明显下降。转基因烟草一方面通过提高过氧化氢酶(CAT)以及抗坏血酸过氧化物酶(APX)的活性来清除H2O2,另一方面通过调节抗坏血酸-谷胱甘肽循环中(AsA-GSH cycle)的关键酶单脱氧抗坏血酸还原酶(MDAR)以及谷胱甘肽还原酶(GR)的活性来增加还原型谷胱甘肽水平,同时,还增加了叶片中非蛋白巯基的含量,进而清除活性氧,减少盐害引起氧化胁迫。因此,盐胁迫下转基因烟草中的叶绿素含量以及叶绿素a/b维持较高水平,从而维持较高的光合速率和生长状态。(本文来源于《北京林业大学学报》期刊2015年06期)

氧还平衡论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

硫氧还蛋白(Trxs)能调控细胞的氧化还原状态,在木本植物中Trxs与耐盐性的关系尚未研究。本文克隆了非泌盐红树秋茄的硫氧还蛋白基因KcTrxf,并研究KcTrxf在植物耐盐性中的作用。qRT-PCR结果显示,秋茄在盐胁迫下KcTrxf表达量上调,并且叶片中的非蛋白巯基(NPTs)的含量上升。KcTrxf基因的开放阅读框(ORF)长585bp,编码194个氨基酸,是一类定位于叶绿体中的f类硫氧还蛋白。将重组的35S:KcTrxf表达载体转入模式植物烟草中进行耐盐性分析,结果表明,KcTrxf提高了烟草的耐盐性。NaCl处理下,野生型烟草叶片中膜质氧化,并且积累大量活性氧,使叶绿素含量以及叶绿素a/b比值明显下降。转基因烟草一方面通过提高过氧化氢酶(CAT)以及抗坏血酸过氧化物酶(APX)的活性来清除H2O2,另一方面通过调节抗坏血酸-谷胱甘肽循环中(AsA-GSH cycle)的关键酶单脱氧抗坏血酸还原酶(MDAR)以及谷胱甘肽还原酶(GR)的活性来增加还原型谷胱甘肽水平,同时,还增加了叶片中非蛋白巯基的含量,进而清除活性氧,减少盐害引起氧化胁迫。因此,盐胁迫下转基因烟草中的叶绿素含量以及叶绿素a/b维持较高水平,从而维持较高的光合速率和生长状态。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

氧还平衡论文参考文献

[1].张慧.硫氧还蛋白DCC1介导的活性氧平衡调控不同生态型拟南芥芽再生能力差异的分子机理研究[D].山东农业大学.2016

[2].荆晓姝,孙苑玲,向敏,钱泽勇,郎涛.秋茄硫氧还蛋白调控活性氧平衡增强烟草耐盐机制研究[J].北京林业大学学报.2015

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