型脱水蛋白论文-史学英,田野,李核,齐玉红,张林生

型脱水蛋白论文-史学英,田野,李核,齐玉红,张林生

导读:本文包含了型脱水蛋白论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:脱水蛋白,非生物胁迫,小麦,乳酸脱氢酶

型脱水蛋白论文文献综述

史学英,田野,李核,齐玉红,张林生[1](2019)在《小麦K_2型脱水蛋白DHN14响应非生物胁迫的功能分析》一文中研究指出【目的】研究脱水蛋白DHN14的功能及其在植物响应非生物胁迫中的潜在作用。【方法】从小麦品种"郑引1号"克隆获得脱水蛋白基因DHN14,对其进行生物信息学分析,利用实时定量PCR分析该基因在逆境胁迫下的表达水平,构建脱水蛋白DHN14基因的原核表达载体(重组菌pET28a-DHN14),经IPTG诱导表达后,在非生物胁迫下,研究该蛋白对大肠杆菌及乳酸脱氢酶(LDH)的保护作用。【结果】克隆获得脱水蛋白基因DHN14的CDS为339 bp,编码112个氨基酸,该蛋白含有2个保守的K片段,属于高亲水性无序蛋白,其分子质量为24 ku,等电点(pI)约为6.28;多序列比对分析表明,DHN14蛋白与WCOR726(Triticum aestivum)脱水蛋白的亲缘关系最近;实时定量RT-PCR结果表明,脱水蛋白基因DHN14受干旱、低温和ABA诱导表达;在20 mmol/L金属离子(Co~(2+)、Ni~(2+)、Cu~(2+)、Zn~(2+))胁迫下,表达DHN14重组蛋白的大肠杆菌的活力明显高于对照,表明该蛋白在大肠杆菌中对金属离子胁迫具有保护作用;用1.0 mmol/L过氧化氢进行胁迫处理,重组菌DHN14存活率显着增高,说明脱水蛋白DHN14能够提高大肠杆菌对过氧化氢胁迫的耐受性;在低温和脱水胁迫下,DHN14脱水蛋白对乳酸脱氢酶的活性具有保护作用。【结论】小麦脱水蛋白DHN14能够响应非生物胁迫,提高对低温、干旱、金属离子、过氧化氢的耐受性。(本文来源于《西北农林科技大学学报(自然科学版)》期刊2019年05期)

李核[2](2016)在《小麦Kn型脱水蛋白WCOR80和DHN14功能的分析》一文中研究指出脱水蛋白(dehydrin)属于胚胎发育后期丰富蛋白(LEA Proteins)二家族,分子量约在9-200kD,一般在高等植物胚胎发育后期产生,在非生物胁迫(如低温、重金属、干旱、盐等胁迫)和生物胁迫(如外源性ABA、病菌、真菌、虫害等胁迫)下诱导表达,是高等植物响应外界胁迫产生的应答蛋白质之一;研究表明,脱水蛋白都含有至少1个K片段保守序列,认为该片段在胁迫过程中是形成α螺旋的特异结构;脱水蛋白具有高度的亲水性和热稳定性,在植物响应逆境胁迫的过程中会起到潜在的积极作用,并且研究小麦脱水蛋白的功能以及在逆境胁迫下的表达调控机制,对于小麦品种改良和指导实际生产有着重要的意义本实验以郑引1号小麦为材料,从小麦cDNA中克隆得到脱水蛋白基因DHN14和WCOR80,获得DHNl4基因开放阅读框为339bp、WCOR80基因开放阅读框为282bp,通过分析这两种脱水蛋白的基因在不同胁迫下的表达情况、脱水蛋白在胁迫下大肠杆菌生长状况的影响和乳酸脱氢酶活性的保护作用,对两种脱水蛋白在逆境胁迫中的功能以及K片段在脱水蛋白发挥作用时所扮演的角色进行了探究,从而为研究植物体内脱水蛋白的结构和在逆境环境中所具有的潜在功能提供理论依据。通过以上研究,获得了以下结论。克隆获得小麦脱水蛋白基因DHN14和WCOR80全长序列,两种基因编码的氨基酸序列都含有2个K片段保守序列,属于Kn型脱水蛋白。1.对两种小麦脱水蛋白基因进行利用生物信息学软件进行分析可知,DHN14蛋白分子量为24kD,等电点为6.28,无序结构占总蛋白的81%,是一种酸性蛋白;WCOR80蛋白分子量为23Kd,等电点为7.14,无序结构占总蛋白的83%,是一种中性蛋白。2.小麦DHN14和WCOR80脱水蛋白均可以在低温胁迫下(4-C处理0h、12h、24h、48h、72h)诱导表达,并且在低温处理复温后,两种脱水蛋白的表达量有不同程度的下降,说明脱水蛋白DHN14和WCOR80是低温诱导表达蛋白;在外源ABA处理下,DHN14脱水蛋白能够在36h诱导产生,并且随着作用时间的延长表达量持续增加,而WCOR80在外源ABA作用下表达量未发生明显的变化,表明DHN14脱水蛋白是依赖ABA的脱水蛋白,而WCOR80蛋白为非依赖ABA的脱水蛋白;在聚乙二醇(PEG)处理下,DHN14和WCOR80蛋白均能够被诱导表达,说明两种蛋白属于干旱诱导蛋白。3.重金属离子和过氧化氢能够抑制大肠杆菌生长,当加入我们克隆的DHN14和WCOR80基因载体的菌株时,能够明显的改善在重金属离子和过氧化氢胁迫下的生长情况,说明在重金属离子和过氧化氢作用下,DHN14和WCOR80蛋白能够增强大肠杆菌对离子胁迫和过氧化氢胁迫的耐受性。其中DHN14蛋白的保护能力是优于WCOR80蛋白的。4.构建DHN14和WCOR80两种脱水蛋白表达载体,表达并纯化该蛋白,验证两种脱水蛋白对乳酸脱氢酶(LDH)酶活的保护能力,以牛血清白蛋白(BSA)为阳性对照、以蔗糖(Sucrose)以及缓冲液为阴性对照,研究结果表明:脱水蛋白DHN14和WCOR80两种蛋白都对LDH的酶活都具有保护作用,该结果对脱水蛋白在植物体内发挥更多的潜在作用提供了依据。(本文来源于《西北农林科技大学》期刊2016-05-01)

孙雅慧,罗桂花,柴团耀,王慧春,徐进[3](2016)在《芥菜型油菜中SK_2型脱水蛋白的表达对大肠杆菌抗逆性的影响》一文中研究指出为了阐明印度芥菜脱水蛋白家族基因BjDHN2和BjDHN3对非生物逆境胁迫的耐受性,我们构建了原核表达载体pET30a-BjDHN2和pET30a-BjDHN3并转化大肠杆菌BL21。在低温、干旱和高盐环境中,与含有空载体对照菌株无BjDHN2和BjDHN3基因相比,重组菌中BjDHN2和BjDHN3蛋白的表达可以在一定程度上缓解寒、旱、盐胁迫对大肠杆菌生长所产生的抑制作用。结果表明,过表达BjDHN2和BjDHN3可提高大肠杆菌对寒、旱、盐等逆境胁迫的耐受性。(本文来源于《山西农业大学学报(自然科学版)》期刊2016年04期)

型脱水蛋白论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

脱水蛋白(dehydrin)属于胚胎发育后期丰富蛋白(LEA Proteins)二家族,分子量约在9-200kD,一般在高等植物胚胎发育后期产生,在非生物胁迫(如低温、重金属、干旱、盐等胁迫)和生物胁迫(如外源性ABA、病菌、真菌、虫害等胁迫)下诱导表达,是高等植物响应外界胁迫产生的应答蛋白质之一;研究表明,脱水蛋白都含有至少1个K片段保守序列,认为该片段在胁迫过程中是形成α螺旋的特异结构;脱水蛋白具有高度的亲水性和热稳定性,在植物响应逆境胁迫的过程中会起到潜在的积极作用,并且研究小麦脱水蛋白的功能以及在逆境胁迫下的表达调控机制,对于小麦品种改良和指导实际生产有着重要的意义本实验以郑引1号小麦为材料,从小麦cDNA中克隆得到脱水蛋白基因DHN14和WCOR80,获得DHNl4基因开放阅读框为339bp、WCOR80基因开放阅读框为282bp,通过分析这两种脱水蛋白的基因在不同胁迫下的表达情况、脱水蛋白在胁迫下大肠杆菌生长状况的影响和乳酸脱氢酶活性的保护作用,对两种脱水蛋白在逆境胁迫中的功能以及K片段在脱水蛋白发挥作用时所扮演的角色进行了探究,从而为研究植物体内脱水蛋白的结构和在逆境环境中所具有的潜在功能提供理论依据。通过以上研究,获得了以下结论。克隆获得小麦脱水蛋白基因DHN14和WCOR80全长序列,两种基因编码的氨基酸序列都含有2个K片段保守序列,属于Kn型脱水蛋白。1.对两种小麦脱水蛋白基因进行利用生物信息学软件进行分析可知,DHN14蛋白分子量为24kD,等电点为6.28,无序结构占总蛋白的81%,是一种酸性蛋白;WCOR80蛋白分子量为23Kd,等电点为7.14,无序结构占总蛋白的83%,是一种中性蛋白。2.小麦DHN14和WCOR80脱水蛋白均可以在低温胁迫下(4-C处理0h、12h、24h、48h、72h)诱导表达,并且在低温处理复温后,两种脱水蛋白的表达量有不同程度的下降,说明脱水蛋白DHN14和WCOR80是低温诱导表达蛋白;在外源ABA处理下,DHN14脱水蛋白能够在36h诱导产生,并且随着作用时间的延长表达量持续增加,而WCOR80在外源ABA作用下表达量未发生明显的变化,表明DHN14脱水蛋白是依赖ABA的脱水蛋白,而WCOR80蛋白为非依赖ABA的脱水蛋白;在聚乙二醇(PEG)处理下,DHN14和WCOR80蛋白均能够被诱导表达,说明两种蛋白属于干旱诱导蛋白。3.重金属离子和过氧化氢能够抑制大肠杆菌生长,当加入我们克隆的DHN14和WCOR80基因载体的菌株时,能够明显的改善在重金属离子和过氧化氢胁迫下的生长情况,说明在重金属离子和过氧化氢作用下,DHN14和WCOR80蛋白能够增强大肠杆菌对离子胁迫和过氧化氢胁迫的耐受性。其中DHN14蛋白的保护能力是优于WCOR80蛋白的。4.构建DHN14和WCOR80两种脱水蛋白表达载体,表达并纯化该蛋白,验证两种脱水蛋白对乳酸脱氢酶(LDH)酶活的保护能力,以牛血清白蛋白(BSA)为阳性对照、以蔗糖(Sucrose)以及缓冲液为阴性对照,研究结果表明:脱水蛋白DHN14和WCOR80两种蛋白都对LDH的酶活都具有保护作用,该结果对脱水蛋白在植物体内发挥更多的潜在作用提供了依据。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

型脱水蛋白论文参考文献

[1].史学英,田野,李核,齐玉红,张林生.小麦K_2型脱水蛋白DHN14响应非生物胁迫的功能分析[J].西北农林科技大学学报(自然科学版).2019

[2].李核.小麦Kn型脱水蛋白WCOR80和DHN14功能的分析[D].西北农林科技大学.2016

[3].孙雅慧,罗桂花,柴团耀,王慧春,徐进.芥菜型油菜中SK_2型脱水蛋白的表达对大肠杆菌抗逆性的影响[J].山西农业大学学报(自然科学版).2016

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