赵洪哲:牛病毒性腹泻病毒单克隆抗体的制备及其应用论文

赵洪哲:牛病毒性腹泻病毒单克隆抗体的制备及其应用论文

本文主要研究内容

作者赵洪哲,范峻豪,李新培,王昊,关平原,温永俊(2019)在《牛病毒性腹泻病毒单克隆抗体的制备及其应用》一文中研究指出:为制备牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV)单克隆抗体(MAb)及其直接荧光标记抗体,本试验用纯化的牛病毒性腹泻病毒Ht01株免疫雌性BALB/c小鼠。间接ELISA测其血清效价,取抗体效价达标小鼠的脾细胞与SP2/0细胞融合。用间接ELISA筛选阳性细胞株并进行2次亚克隆后注射入小鼠腹腔制备单抗腹水。利用辛酸-硫酸铵沉淀法纯化腹水,用间接免疫荧光试验测定其活性,用SDS-PAGE试验测定其纯度。经活性、纯度检测合格后,采用搅拌法与异硫氰酸荧光素(FITC)偶联;用葡聚糖G-25 Medium介质进行分离纯化。结果,本研究共获得2株能够稳定分泌IgG1类型的阳性杂交瘤细胞株和一种直接荧光抗体,分别被命名为BMAb11、BMAb20、DB11。稳定性试验表明,杂交瘤细胞分泌的抗体稳定性好。ELISA、间接免疫荧光试验和直接免疫荧光试验表明,单克隆抗体和直标荧光抗体均与BVDV发生特异性反应,说明它们的特异性较好。经ELISA鉴定,腹水抗体效价达到1∶12 800。直接荧光抗体荧光素与蛋白的摩尔比(F/P)为3.34,标准值在2.0~4.0之间,符合标准。上述研究结果表明,本研究制备的单克隆抗体和直标荧光抗体可用于BVDV的检测,为BVDV的临床诊断奠定了基础。

Abstract

wei zhi bei niu bing du xing fu xie bing du (bovine viral diarrhea virus,BVDV)chan ke long kang ti (MAb)ji ji zhi jie ying guang biao ji kang ti ,ben shi yan yong chun hua de niu bing du xing fu xie bing du Ht01zhu mian yi ci xing BALB/cxiao shu 。jian jie ELISAce ji xie qing xiao jia ,qu kang ti xiao jia da biao xiao shu de pi xi bao yu SP2/0xi bao rong ge 。yong jian jie ELISAshai shua yang xing xi bao zhu bing jin hang 2ci ya ke long hou zhu she ru xiao shu fu qiang zhi bei chan kang fu shui 。li yong xin suan -liu suan an chen dian fa chun hua fu shui ,yong jian jie mian yi ying guang shi yan ce ding ji huo xing ,yong SDS-PAGEshi yan ce ding ji chun du 。jing huo xing 、chun du jian ce ge ge hou ,cai yong jiao ban fa yu yi liu qing suan ying guang su (FITC)ou lian ;yong pu ju tang G-25 Mediumjie zhi jin hang fen li chun hua 。jie guo ,ben yan jiu gong huo de 2zhu neng gou wen ding fen bi IgG1lei xing de yang xing za jiao liu xi bao zhu he yi chong zhi jie ying guang kang ti ,fen bie bei ming ming wei BMAb11、BMAb20、DB11。wen ding xing shi yan biao ming ,za jiao liu xi bao fen bi de kang ti wen ding xing hao 。ELISA、jian jie mian yi ying guang shi yan he zhi jie mian yi ying guang shi yan biao ming ,chan ke long kang ti he zhi biao ying guang kang ti jun yu BVDVfa sheng te yi xing fan ying ,shui ming ta men de te yi xing jiao hao 。jing ELISAjian ding ,fu shui kang ti xiao jia da dao 1∶12 800。zhi jie ying guang kang ti ying guang su yu dan bai de ma er bi (F/P)wei 3.34,biao zhun zhi zai 2.0~4.0zhi jian ,fu ge biao zhun 。shang shu yan jiu jie guo biao ming ,ben yan jiu zhi bei de chan ke long kang ti he zhi biao ying guang kang ti ke yong yu BVDVde jian ce ,wei BVDVde lin chuang zhen duan dian ding le ji chu 。

论文参考文献

  • [1].融合杂交瘤细胞单克隆抗体工程[J]. 杜平.  第二军医大学学报.1982(03)
  • [2].单克隆抗体[J]. 本刊编辑部.  湖北畜牧兽医.1990(03)
  • [3].分泌TSH单克隆抗体的杂交瘤细胞株的建立[J]. 同位素所.  同位素.1994(04)
  • [4].抗人粒细胞集落刺激因子单克隆抗体的研制[J]. 顾宗江,孙震,陈永珍,张毅,戴燕芳,张学光.  苏州医学院学报.1994(05)
  • [5].单克隆抗体的应用——企业化的可能性[J]. 杉正人,喻致详.  遗传工程.1985(03)
  • [6].鼠抗粒细胞集落刺激因子单克隆抗体的研制[J]. 王翎,李修兰,尹红章,李德富.  细胞与分子免疫学杂志.1995(02)
  • [7].一种制备单克隆抗体的更有效而经济的方法[J].   国外医学(临床生物化学与检验学分册).1998(05)
  • [8].小鼠形成腹水性肿瘤和产生单克隆抗体的影响因素[J]. B·R·Brodeur,陈勇.  细胞与分子免疫学杂志.1985(02)
  • [9].抗人IgG单克隆抗体的研究Ⅳ.酶标试剂的实际应用[J]. 江敬珏,陈晓红,钱明,容秉培,章谷生.  上海免疫学杂志.1986(01)
  • [10].重组人白细胞介素10单克隆抗体的制备[J]. 陈飞虎,盛晓蓉,吴亦伦,陈敏珠,智强.  安徽医科大学学报.2000(02)
  • 论文详细介绍

    论文作者分别是来自中国兽医科学的赵洪哲,范峻豪,李新培,王昊,关平原,温永俊,发表于刊物中国兽医科学2019年03期论文,是一篇关于牛病毒性腹泻病毒论文,杂交瘤细胞论文,单克隆抗体论文,直标荧光抗体论文,中国兽医科学2019年03期论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自中国兽医科学2019年03期论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。

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